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domenica 10 dicembre 2017
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News

Co-colture cellulari per creare un modello di barriera emato-encefalica umana in vitro

Sebbene le metastasi cerebrali siano i tumori cerebrali più comuni negli adulti, ci sono ancora poche opzioni di trattamento di queste condizioni cliniche. Per colonizzare il cervello, le cellule tumorali circolanti devono attraversare la barriera emato-encefalica (BEE), che si trova all'interno si un endotelio specializzato, molto restrittivo e microvascolarizzato.

Capire come le cellule tumorali riescano a trasmigrare attraverso la BEE potrebbe consentire di evitare questo processo. I modelli in vitro sono strumenti dedicati per la caratterizzazione dei meccanismi cellulari e molecolari alla base dei processi di migrazione transendoteliale, fintanto che imitano accuratamente le caratteristiche dell'endotelio del cervello.

L'obiettivo di questo studio di Elodie Vandenhaute e colleghi è stato quello di adattare un modello in vitro esistente di BEE umana per l'uso in studi di trasmigrazione delle cellule tumorali. Il modello si basa sulla co-coltura di cellule endoteliali (EC, derivate da cellule staminali ematopoietiche del sangue del cordone) e periciti cerebrali. Per consentire la migrazione delle cellule tumorali al compartimento inferiore, il modello in vitro è stato trasposto su degli inserti con pori più grandi. Tuttavia, i ricercatori hanno incontrato un problema quando la coltura di EC è stata inserita su larghi pori (3 micron): le cellule hanno attraversato la membrana e formato un secondo strato non fisiologico sulla faccia inferiore dell'inserto. Utilizzando inserti con pori di 3-micron (in formato 12-pozzetti), i ricercatori hanno trovato un metodo che permette il mantenimento di un singolo monostrato di cellule endoteliali solo sulla faccia superiore dell'inserto. In queste condizioni scelte, l'EC espone proprietà tipiche della BEE ritrovate nel modello originale (tra cui la permeabilità paracellulare limitato e l'espressione di giunzioni strette contigue). Questa modifica del modello in vitro della BEE umana ha permesso di studiare il potenziale migratorio della linea di cellule MDA-MB-231 (derivato da cellule di cancro al seno umano, altamente metastatico). Infine, i risultati ottenuti sono stati confrontati con il tasso di trasmigrazione attraverso endoteli senza le caratteristiche della BEE.


Fonte: doi: 10.1038 / labinvest.2016.35

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