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martedì 25 giugno 2019
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I residui 39-56 di Stem Cell Factor stimolano l'espansione di CD34+ cordonali

Il fattore delle cellule staminali (SCF) è in grado di stimolare l’espansione delle cellule staminali ematopoietiche (HSC); tuttavia, ancora non si conosce quale sia la regione strutturale specifica di SCF critica per questa funzione. Un anticorpo monoclonale (denominato 23C8) contro SCF ricombinante umano (rhSCF) è stato precedentemente trovato per inibire la capacità di rhSCF di migliorare l’espansione delle HSC, rendendo possibile identificare la regione attiva rilevante per HSC.

Il fattore delle cellule staminali (SCF) è in grado di stimolare l’espansione delle cellule staminali ematopoietiche (HSC); tuttavia, ancora non si conosce quale sia la regione strutturale specifica di SCF critica per questa funzione. Un anticorpo monoclonale (denominato 23C8) contro SCF ricombinante umano (rhSCF) è stato precedentemente trovato per inibire la capacità di rhSCF di migliorare l’espansione delle HSC, rendendo possibile identificare la regione attiva rilevante per HSC.

Sono stati sintetizzati undici polipeptidi, progettati per coprire l'intera lunghezza di rhSCF, con sovrapposizioni lunghe almeno 3 aminoacidi. Saggi ELISA sono stati utilizzati per identificare il polipeptide che reagiscono specificamente con l'anti-SCF. Sono stati valutati gli effetti dei polipeptidi sintetici sull’espansione di HSC, e la capacità del full-length rhSCF di stimolare la proliferazione cellulare.
Di tutti i polipeptidi analizzati, solo uno, denominato P0, corrispondenti alla sequenza proteica SCF a residui 39-56, ed è stato riconosciuto da mAb 23C8 durante ELISA. P0 stimola l'espansione delle cellule CD34+ derivate dal sangue del cordone ombelicale umano (UCB). L'aggiunta di P0 ha aumentato il numero di cellule mononucleate totali e di cellule CD34 +, di ~ 2 al giorno 6.
P0 ha mostrato concorrenza parziale contro il full-length rhSCF nel saggio di espansione delle cellule ex vivo.

In conclusione i residui 39-56 di rhSCF comprendono una regione funzionale critica per la sua capacità di migliorare l'espansione delle cellule CD34+ umane. Il peptide P0 è un potenziale candidato per un ulteriore sviluppo come sostituto sintetico per rhSCF in applicazioni di laboratorio e cliniche.


Fonte: DOI: 10.1371 / journal.pone.0141485

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