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sabato 15 dicembre 2018
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Rimozione del fibrinogeno per la propagazione di mesenchimali in lisato piastrinico

Il lisato del pool piastrinico umano (pHPL) è un'alternativa efficace agli integratori per l’espansione ex vivo delle cellule staminali mesenchimali (MSC) in studi clinici. Attualmente, l'eparina di maiale viene utilizzata in media per pHPL per prevenire la coagulazione. Sandra Laner-Plamberger e colleghi hanno cercato un metodo di preparazione di media efficace e riproducibile che eviti la formazione di coaguli omettendo eparina di derivazione animale.

Il lisato del pool piastrinico umano (pHPL) è un'alternativa efficace agli integratori per l’espansione ex vivo delle cellule staminali mesenchimali (MSC) in studi clinici. Attualmente, l'eparina di maiale viene utilizzata in media per pHPL per prevenire la coagulazione. Sandra Laner-Plamberger e colleghi hanno cercato un metodo di preparazione di media efficace e riproducibile che eviti la formazione di coaguli omettendo eparina di derivazione animale.

E’ stato stabilito un protocollo per eliminare il fibrinogeno dalla coagulazione. Dopo la coltura primaria, cellule derivate dal midollo osseo e cellule staminali mesenchimali del cordone ombelicale ​​sono state testate per i marcatori di superficie mediante citometria di flusso e per la capacità di differenziazione trilineare. La proliferazione e la clonogenicità sono state analizzate per tre passaggi.

La procedura di coagulazione del fibrinogeno viene ridotta di più di 1000 volte, mentre si è ottenuto un recupero in volume del 99,5%. Tutti i tipi di MSC sono state propagate in terreno standard e impoverito dal fibrinogeno. Il profilo dei marker di espressione e il potenziale di differenziazione sono risultati indipendenti dalla fonte di MSC o dal tipo di media. Maggiore proliferazione delle MSC è stata osservata in assenza di fibrinogeno ma in presenza di eparina rispetto ai media standard. In conclusione è stato presentato un metodo efficiente, riproducibile ed economico per la preparazione di terreni di supporto per MSC evitando componenti xenogeniche e adatto per gli studi clinici.

 

Fonte: doi: 10,1186 / s12967-015-0717-4

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